牙刷亲子鉴定样本采集步骤及注意事项。
采用牙刷作为亲子鉴定样本的关键在于获取附着在刷毛根部的口腔脱落细胞。为确保DNA提取的有效性,需按照以下步骤规范操作:。
一、样本采集流程。
1、选择专用牙刷:牙刷需为被鉴定人单独使用1个月以上,避免混用或多人接触,使用周期不宜超过3个月以保证细胞活性。
2、采样部位处理:佩戴一次性手套,用镊子夹取靠近刷柄的根部刷毛区域,此处细胞密度最高。使用消毒剪刀剪取8-10根带有白色黏着物的刷毛,避免触碰样本表面。
3、样本封装保存:将剪取的刷毛置于透气性纸质信封中,标注采集日期及身份信息。切忌使用塑料袋密封,避免潮湿环境导致DNA降解。样本需在阴凉干燥处静置24小时自然阴干。
二、技术控制要点。
1、防污染措施:操作全程佩戴医用口罩及无菌手套,使用紫外线消毒后的工具。采样前后需用75%酒精擦拭工作台面。
2、时效性要求:样本采集后需在72小时内送达实验室,运输过程中避免高温(>30℃)或剧烈震动。如遇极端天气,建议采用冷链运输箱加冰袋保存。
3、质控标准:实验室接收样本时需进行完整性检查,通过PCR扩增检测人类基因组特异性位点,确保DNA浓度≥0.5ng/μL且纯度(A260/A280)在1.7-2.0之间。
三、应用限制说明。
牙刷样本检出率约85%-92%,低于血液(99.9%)和口腔拭子(98%)。若检测显示STR分型不全,需补送血痕或毛发等常规样本复检。婴幼儿建议优先选择口腔黏膜细胞采集,3岁以下儿童因口腔细胞代谢快,不建议采用牙刷样本。
专业鉴定机构通常配备显微操作台和磁珠法DNA提取系统,可对微量样本进行全基因组扩增。样本送检时需同步提供被鉴定人年龄、采样时间等关键信息,以便实验室优化裂解时间与蛋白酶K用量。